ساکي حسيني, معصومه and دوستي, عباس and پزشکي, ميلاد (2021) از باکتري سالمونلا تيفي موريوم: مطالعه آزمايشگاهي sipA ايجاد سازواره ژني براي حذف ژن. مجله مطالعات علوم پزشکي, 32 (8). pp. 572-580.
Text
1 Hoseini Saki A-10-4758-1.pdf Download (595kB) |
Abstract
هدف: باکتري سالمونلا تيفي موريوم يک باسيل گرم منفي، بدون اسپور، فاقد کپسول، متحرک و داراي فلاژلها يکي از شايعترين پريتريش است. سالمونلا عامل مسموميتهاي غذايي ميباشد. توانايي وارد شدن و زنده ماندن در سلولهاي ميزبان شرط لازم براي بيماريزايي گونههاي سالمونلا است. پروتئين تهاجمي سالمونلا يک فاکتور بيماريزايي مهم است که توسط باکتري به سلولهاي ميزبان منتقل ميشود. اين مطالعه با هدف ساخت سازوارهي ژني براي حذف از باکتري سالمونلا تيفي موريوم و کلون سازي آن در باکتري اشريشيا کلي انجام گرفت. SipA ژن مواد و روش کار: اين مطالعه آزمايشگاهي از مهر ۱۳۹۶ تا خرداد ۱۳۹۷ در مرکز تحقيقات بيوتکنولوژي دانشگاه آزاد اسلامي واحد شهرکرد انجام گرفت. در اين در حامل T/Acloning تکثير گرديد. سپس هرکدام از اين تواليها به روش PCR به کمک پرايمرهاي اختصاصي آنها و روش SipA تحقيق توالي ' 5 و ' 3 ژن قطعات مربوط به هر ناحيه تکثير و تأييد گرديد. تأييد نهايي PCR کلون و سپس به باکتري اشريشيا کلي ترانسفورم گرديد. با استفاده از روش pGEM-Teasy انجام گرفت. XhoI و XbaI سازوارهي حاصل با استفاده از آنزيمهاي يافتهها: نتايج نشاندهندهي کلون سازي موفقيتآميز ژن موردنظر در باکتري اشريشيا کلي و ساخت سازوارهي ژني به طول ۱۵۲۰ جفت باز بود. همچنين حامل به طول ۵۹۰۰ جفت باز ازلحاظ ظرفيت پذيرش بهترين نوع حامل در پذيرش توالي سازواره بود. pET32 بحث و نتيجهگيري: با توجه به نتايج حاصل در اين مطالعه به نظر ميرسد که ميتوان با قرار دادن يک ژن، ژن آسيبزا را حذف و از آن بهعنوان واکسن تضعيفشده عليه سالمونلوزيس مورد استفاده قرار نمود. بهطوريکه ميتوان با روش الکتروپوريشن اين سازواره را وارد باکتري سالمونلا تيفي موريوم کرد و سپس نوترکيبي همولوگ بين اين دو ژن اتفاق ميافتد و ژن بيماريزا حذف خواهد شد. Kan و sipA بهواسطه تشابه تواليهاي فرادست و فرودست ژن
Item Type: | Article |
---|---|
Uncontrolled Keywords: | SipA کلونينگ، ژن T/A ، کليدواژهها: : سالمونلا تيفي موريوم، سازوارهي ژني، اشريشيا کلي |
Subjects: | R Medicine > R Medicine (General) |
Depositing User: | Unnamed user with email gholipour.s@umsu.ac.ir |
Date Deposited: | 07 Jan 2023 06:38 |
Last Modified: | 15 May 2023 09:57 |
URI: | http://eprints.umsu.ac.ir/id/eprint/6865 |
Actions (login required)
View Item |